無(wú)菌室內應備有工作濃度的常用消毒液,如苯酚酸(堿)溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等等。無(wú)菌室的位置一般要求建在人員流動(dòng)較少的地方,距離普通的辦公環(huán)境或者微生物準備室要有一定的距離。無(wú)菌室內必須配備相應的緩沖工作間用于擺放專(zhuān)用白大褂或專(zhuān)用衣帽等。
無(wú)菌室中的物流窗應避免與空氣產(chǎn)生直接對流,最好不要正對著(zhù)無(wú)菌室大門(mén);空調需有可靠的多重高效過(guò)濾除菌系統;所有照明和紫外燈電源總開(kāi)關(guān)應設置于無(wú)菌室門(mén)口或門(mén)外。無(wú)菌室整個(gè)布局設計應按照人、物分離原則,防止交叉污染。
此外,在人員通道可配備高效風(fēng)淋室以減少實(shí)驗人員帶入的污染。對無(wú)菌室和其內部的超凈工作臺、生物安全柜都必須進(jìn)行定期監測和日常維護,并有監測和維護記錄。日常維護主要包括紫外線(xiàn)燈擦拭、濾網(wǎng)擦洗更換、空氣消毒及全面清潔衛生等川。
無(wú)菌室的建材使用控制
用于無(wú)菌室建設的所有材料均應符合消防和環(huán)保要求,具有耐腐蝕和易清潔的特點(diǎn)。無(wú)菌室的內部裝修應整齊、光滑、避免凹凸、所有角落最好設置為球弧體狀以避免灰塵長(cháng)期堆積難以清掃和消毒。
無(wú)菌室的各個(gè)通道進(jìn)出口應采用門(mén)縫緊密且打開(kāi)后能自動(dòng)閉合的推拉式門(mén),墻壁及吊頂應采用隔熱防火、耐化學(xué)腐蝕、耐水分滲透、隔音且易清潔的新型建材以防止塵垢堆積、材料脫落、滋生霉菌、不易清潔等情況的發(fā)生。
總體上,無(wú)菌室應盡量設計成完全封閉的模式,一般僅靠高效過(guò)濾系統與外界進(jìn)行空氣交換。當前空氣潔凈技術(shù)已經(jīng)發(fā)展得比較成熟,在很多學(xué)科領(lǐng)域都得到了廣泛的應用,目前很多食品微生物檢測用的無(wú)菌室也都已采用比較先進(jìn)和方便易用的的層流凈化系統裝置,基本上都能保證食品微生物學(xué)檢驗過(guò)程中無(wú)菌狀態(tài)、恒溫恒濕、穩定風(fēng)速風(fēng)量和空氣潔凈度的要求。
無(wú)菌室環(huán)境及凈化控制
無(wú)菌室無(wú)菌環(huán)境的質(zhì)量控制是微生物檢驗獲得準確數據極為重要的環(huán)節。食品微生物學(xué)檢驗對無(wú)菌的環(huán)境和無(wú)菌操作的要求非常嚴格,整個(gè)檢測過(guò)程始終要求在無(wú)菌狀態(tài)下以無(wú)菌操作方式進(jìn)行,所以對無(wú)菌狀態(tài)的質(zhì)量控制是微生物檢驗結果準確可靠的保證。操作人員要嚴格定期對無(wú)菌室消毒效果進(jìn)行評價(jià),同時(shí)要制定合理的環(huán)境監測程序,對環(huán)境監測結果進(jìn)行數據分析,嚴格按照相應國家標準設定的不同工作區域可接受的菌落數量,對出現超標情況的處理要進(jìn)行文件化控制。
此外,無(wú)菌室內的環(huán)境情況例如溫度和濕度等可能會(huì )影響無(wú)菌室內的消毒滅菌效果,通常情況下溫度應控制在22℃左右,相對濕度不超過(guò)65%會(huì )比較適宜。整個(gè)無(wú)菌室應采用先進(jìn)高效層流空氣凈化系統以保證恒溫、恒濕、換氣量和空氣潔凈度的相關(guān)要求??諝鈨艋到y中的高效過(guò)濾膜能對空氣中不同大小規格的塵埃粒子進(jìn)行有效過(guò)濾,防止附著(zhù)在塵埃粒子上的微生物污染無(wú)菌室;采用從頂部送風(fēng)、下側回風(fēng)的氣流組織方式既保證了潔凈度,又節約了能源。
同時(shí)高效空氣過(guò)濾系統通風(fēng)量能滿(mǎn)足人員的需要,較好解決傳統無(wú)菌室不能置換新鮮潔凈空氣、工作環(huán)境差等問(wèn)題。
此外,應定期對無(wú)菌室的無(wú)菌程度進(jìn)行監測,可參考醫藥工業(yè)潔凈室相關(guān)標準對于塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等項目的限量對食品微生物無(wú)菌室進(jìn)行定期測試。沉降菌法有最簡(jiǎn)單、最直觀(guān),也最能真實(shí)地反映物體表面(特別是控制部位)自然污染程度的特點(diǎn),故也可采用平板計數瓊脂和孟加拉紅瓊脂平板各3塊,等距離置于無(wú)菌室工作位置的一條對角線(xiàn)上,開(kāi)蓋暴露15min,分別在36℃培養48h,28℃培養5d后計數沉降的細菌和霉菌及酵母的菌落數,若平均菌落數超過(guò)3CFU/皿,則應當對無(wú)菌室空氣和無(wú)菌室內的物體表面進(jìn)行消毒以改善其無(wú)菌環(huán)境。